流式细胞术在免疫学中的应用

[日期:2010-10-19   作者:方慧云   科室:肿瘤研究所 ]

    流式细胞术(FCM)与单克隆抗体结合,对细胞表面和细跑内抗原、癌基因蛋白及膜内受体的定量检测取得很大进展,并广泛应用于临床医学,克服了普通免疫学方法难以准确定量的不足。在临床医学研究中,应用最为广泛的是流式细胞免疫表型分析,FCM可以进行淋巴细胞亚群分析,可同时检测出一种或几种淋巴细胞表面亚群分析,将不同的淋巴细胞亚群区分开来,并计算出它们相互间的比例。通过对病人淋巴细胞各亚群数量的测定了解淋巴细胞的分化功能,鉴别新的淋巴细胞亚群。更重要的是通过研究大多数疾病的特异性淋巴细胞亚群或某些细胞表面标志的存在、缺乏、过度表达等,对一些疾病,如免疫性疾病、感染性疾病、肿瘤等诊断、治疗、免疫功能重建和器官移植监测等有重要的临床意义。已有作者报道了外周血淋巴细胞免疫表型的参考值,并对其种族、性别、年龄等影响因素进行了探讨。同样此种测定技术也可用于感染及其治疗效果观察,如HIV主要侵袭CD4+T细胞而导致CD4淋巴细胞减少,CD4/CD8淋巴细胞比值下降,为艾滋病的诊断和治疗提供依据。在其它免疫功能性疾病的诊治方面如系统性红斑狼疮(SLZ)患者的淋巴细胞变化可反映该病的活动情况和器官侵犯程度。伴有严重肾脏损害的SLE患者可出现低CD4+、高CD8+的现象。此外,FCM可以用来进行组织相容性抗原(HLA)群体分析。HLA-B27抗原阳性与强直性脊柱炎等一系列关节病有着不同程度的正相关。FCM应用HLA-B27特异性单抗柱测抗原其敏感性较传统的微量细胞毒性实验大大提高,同时多参数的荧光测定使我们能够在特定的细胞亚群中分析HLA-B27,还可以利用FCM进行移植配型移植后免疫状态监测。